REQUISITOS
Para el practico del laboratorio cada estudiante deberá de estar con su atuendo para el laboratorio: pijama azul, barbijo, alcohol al 70%,
1. Fundamento de la Extracción de ARN
El ácido ribonucleico (ARN) es una biomolécula fundamental para la expresión génica, ya que participa en la síntesis de proteínas y la regulación de numerosos procesos celulares. La extracción de ARN es un procedimiento crítico en biología molecular que permite estudiar la expresión génica, analizar perfiles transcriptómicos y realizar diagnósticos moleculares.
Dado que el ARN es altamente inestable y susceptible a la degradación por ribonucleasas (RNAsas), es esencial utilizar técnicas adecuadas y mantener condiciones rigurosas de esterilidad y control de temperatura para evitar su degradación.
2. Técnicas de Laboratorio para la Extracción de ARN
Existen varias técnicas para la extracción de ARN, las más utilizadas incluyen:
a) Método con Trizol (fenol-cloroformo)
- Se basa en la lisis celular con un reactivo que contiene fenol y guanidina, lo que permite la separación de ARN, ADN y proteínas en distintas fases.
- Tras la centrifugación, el ARN se encuentra en la fase acuosa y se precipita con isopropanol.
- Este método es eficiente y ampliamente usado en investigación.
b) Extracción con Kits Basados en Columnas de Sílice
- Utiliza columnas con membranas de sílice que retienen selectivamente el ARN bajo ciertas condiciones de pH y concentración salina.
- Permite una purificación rápida y reproducible, con alta pureza y menor contaminación con ADN o proteínas.
- Se usa en estudios de expresión génica y transcriptómica.
c) Método con Beads Magnéticas
- Utiliza nanopartículas con afinidad selectiva por el ARN.
- Ofrece una alta eficiencia en la purificación y se integra fácilmente en procesos automatizados.
d) Métodos de Extracción Automatizados
- Se basan en el uso de robots para la purificación del ARN, reduciendo la variabilidad y el tiempo de procesamiento.
- Se emplea en laboratorios de diagnóstico clínico y estudios a gran escala.
3. Aplicaciones de la Extracción de ARN
- Transcriptómica: Análisis de perfiles de expresión génica mediante RNA-Seq o microarrays.
- Diagnóstico molecular: Detección de enfermedades infecciosas y cáncer mediante RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa).
- Biotecnología: Producción de ARN mensajero (ARNm) sintético para terapias génicas y vacunas.
- Epigenética: Estudio de modificaciones postranscripcionales y ARN no codificante.
