REQUISITOS
Para el laboratorio cada estudiante deberá de estar con su atuendo para el laboratorio: pijama azul, barbijo, alcohol al 70%, bolsa de plástico, un retazo de tela que no deje pelusas, para limpiar el material, marcador permanente de vidrio, cinta masking de 1,5 cm de ancho. Muestras para cada grupo.
Extracción del ADN genómico de plantas
La extracción del ADN genómico de plantas es un proceso fundamental en biología molecular y biotecnología. Permite obtener el material genético de la planta en forma pura y concentrada para su posterior análisis y manipulación.
Fundamento
El ADN genómico de las plantas se encuentra en el núcleo de sus células. La extracción de este ADN implica romper las paredes celulares y membranas nucleares, separar el ADN de otros componentes celulares (proteínas, lípidos, carbohidratos) y purificarlo.
Conceptos clave
- Lisis celular: Proceso de ruptura de las células para liberar el contenido celular, incluyendo el ADN.
- Separación del ADN: Eliminación de componentes celulares no deseados mediante técnicas como centrifugación, precipitación y lavado.
- Purificación del ADN: Obtención de ADN libre de contaminantes que puedan interferir con su análisis.
Métodos de extracción
Existen diversos métodos para extraer ADN genómico de plantas, cada uno con sus ventajas y desventajas. Algunos de los más comunes son:
- Método CTAB: Utiliza el detergente CTAB (bromuro de cetiltrimetilamonio) para lisar las células y separar el ADN. Es adecuado para plantas con alto contenido de polisacáridos y polifenoles.
- Método SDS: Emplea el detergente SDS (dodecil sulfato de sodio) para lisar las células. Es un método más sencillo pero puede ser menos eficiente para plantas con compuestos interferentes.
- Kits comerciales: Existen kits de extracción de ADN que simplifican el proceso y ofrecen resultados reproducibles.
Pasos generales
- Muestreo: Se toma una muestra de tejido vegetal (hojas, tallos, raíces) y se macera o se tritura.
- Lisis celular: Se añade un tampón de lisis que contiene detergentes y enzimas para romper las células y liberar el ADN.
- Separación del ADN: Se utilizan técnicas como centrifugación y precipitación para separar el ADN de otros componentes celulares.
- Purificación del ADN: Se lava el ADN para eliminar restos de detergentes, proteínas y otros contaminantes.
- Almacenamiento: El ADN purificado se almacena en condiciones adecuadas para su posterior uso.
